Для чего проводится ПЦР, расшифровка результатов

Аббревиатуру ПЦР в современной медицине можно встретить достаточно часто. Она расшифровывается как полимеразная цепная реакция. Это современная методика, при которой проводится выявление и идентификация генетического материала (ДНК или РНК) микроорганизмов в исследуемом материале.

Первым разработал и внедрил в практику методику полимеразной цепной реакции американский ученый биохимик Кэри Муллисом в 1983 году, за что он был удостоен Нобелевской премии.

Принцип методики

Основной принцип и механизм методики заключается в многократном копировании участка молекулы ДНК (дезоксирибонуклеиновая кислота) или РНК (рибонуклеиновая кислота) в лабораторных условиях (in vitro) при помощи специальных ферментов, катализирующих данную реакцию. Поэтому полимеразная цепная реакция еще имеет название амплификация нуклеотидов. Перед проведением многократного копирования задаются определенные условия, что позволяет увеличивать количество только исследуемых молекул нуклеотидных оснований. То есть накопление генетического материала происходит только при условии его наличия в исследуемом материале. Именно на этом принципе основывается клиническое применение ПЦР, при котором выявляются только молекулы генома исследуемого патогенного (болезнетворного) микроорганизма.

Именно возможность устанавливать условия многократного копирования молекул генетического материала стала основой широкого применения ПЦР в клинической практике для диагностики различных инфекционных заболеваний.

Показания к проведению

В практической медицине ПЦР применяется в качестве метода лабораторной диагностики инфекционных заболеваний, что позволяет выявлять и идентифицировать генетический материал возбудителя для подтверждения диагноза. Идентификация патогенного микроорганизма дает возможность подобрать наиболее эффективную этиотропную терапию, направленную на его уничтожение. Данная методика диагностики применяется в нескольких областях практической медицины:

• Инфекционные болезни – проводится диагностика различных кишечных (сальмонеллез, дизентерия), кровяных (малярия, вирусные гепатиты, ВИЧ СПИД) инфекций.
• Хирургия – определение возбудителя гнойного процесса.
• Урология и дерматовенерология – диагностика возбудителей половых инфекций, вызванных специфическими бактериями (хламидии, уреаплазмы, микоплазмы), вирусами (цитомегаловирус, вирус герпеса и папилломы человека), простейшими одноклеточными микроорганизмами (трихомонады).

Кроме практической отрасли медицины, ПЦР занимает ведущее место в криминологии (выявление генетического материала по потожировым следам для установления личности преступника), диагностика некоторых генетических заболеваний человека (выявление нарушенного гена), экспериментальная медицина (используется для экспериментов по клонированию тканей).

Расшифровка результатов исследования

В большинстве случаев после проведения полимеразной цепной реакции получают качественный результат, который может быть положительным (в исследуемом материале определено наличие патогенного микроорганизма) или отрицательным (микроорганизм не был обнаружен). Также существуют количественные методики ПЦР, дающие возможность оценить количество патогенных микроорганизмов в единице объема материала. В этом случае положительный результат исследования содержит численное обозначение количества возбудителей в 1 мл материала.

Преимущества методики

ПЦР является современной методикой, которую применяет все большее количество различных медицинских клиник. Это связано с рядом преимуществ данного метода лабораторной диагностики, к которым относятся:

• Специфичность – заданные условия амплификации нуклеиновых кислот только к одному виду патогенных микроорганизмов не дают возможность получения ложноположительного результата.
• Высокая чувствительность – для получения положительного результата исследования достаточно нахождения в исследуемом материале только фрагмента ДНК или РНК возбудителя.
• Скорость проведения – в отличие от других методик исследования, результаты ПЦР можно получить уже на следующий день.
• Возможность получения количественного результата, который указывает на количество патогенных микроорганизмов в исследуемом материале.
• Универсальность – для проведения исследования на наличие разных возбудителей аппаратура применяется одна и та же, меняются только наборы реактивов, поэтому методика подходит для проведения диагностики по различным медицинским показаниям.

Единственным существенным недостатком данного метода диагностики является невозможность проведения определения чувствительности выявленных бактерий к антибиотикам. Для этого в спектр диагностических мероприятий включается бактериологическое исследование.

Подготовка к исследованию

В целом большого количества подготовительных рекомендаций перед проведением ПЦР нет. Основным условием получения достоверного результата является наличие возбудителя в исследуемом материале. Поэтому в течение нескольких недель до его проведения рекомендуется исключение проведения этиотропной терапии при помощи антибиотиков, противопротозойных или противовирусных средств.

Боле подробные рекомендации в отношении подготовки к сдаче анализа дает лечащий врач во время консультативного приема. Также он помогает расшифровать полученные результаты, на основании которых назначает лечение или дальнейшую диагностику.